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      人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

      日期:2017-03-15 09:11:56 人氣:1124

      應用領域:
      生物產業
      實驗設備:
      檢測樣品:
      重組人白細胞介素
      檢測項目:
      乙腈殘留
      下載地址:

      重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定

      1 儀器配置

      ①磐諾 GC A91 氣相色譜儀,配置 FID 檢測器

      ②自動頂空進樣器(上海/HS-16A)

      2 實驗方法

      2.1 色譜條件

      進樣口:220℃,分流比 10:1

      色譜柱:DB-WAX 30m×0.32mm×0.50ìm,2.4ml/min(恒流模式)

      爐膛:45℃

      FID:250℃,H2 30ml/min,Air 300ml/min,Make-up 30ml/min

      頂空進樣器:平衡溫度 75℃,定量管溫度 100℃,傳輸管溫度 100℃,平衡時間 30min

      2.2 對照品溶液及供試品溶液制備對照品溶液配制精密稱取乙腈 7.8mg  250ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為對照品溶液。供試品溶液配制精密稱取供試品約 0.5g  5ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為供試品溶液。

      2.3 乙腈含量測定

      分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各 2ml,置 20ml 頂空瓶中,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。

      3 實驗結果

      3.1 重現性試驗

      精密量取 2.2 中所述對照品溶液 2.0ml,共份,置個頂空瓶中,按 2.1~2.3 中方法測定,結果峰面積的相對標準偏差(RSD) 3.08%。

      表 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

      編號

      1

      2

      3

      4

      5

      6

      平均值

       

       

       

       

       

       

       

       

      峰面積

      32.82

      34.95

      32.72

      32.77

      34.82

      33.64

      33.62

      RSD%

       

       

       

      3.08

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

      人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

      圖 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

      3.1 線性關系考查

      精密量取對照品溶液 2.0、1.0、0.5、0.2、0.1ml,各 2 份于 10 個頂空瓶中,再分別加入蒸餾水 0、1.0、1.5、1.8、1.9ml 后,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。以積分面積為縱坐標,2ml H20 中乙腈含量為橫坐標,線性擬合,回歸方程為 Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998。測試結果見表和圖 2。

      重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

      編號

      X

       

      Y 峰面積

       

       

      2ml H20 中乙腈含量/ìg

       

       

       

       

      Test-1

      Test-2

      平均值

       

       

       

       

       

      1

      62.4

      34.25

      33.6

      33.93

       

      2

      31.2

      16.73

      17.32

      17.03

       

      3

      15.6

      8.29

      8.16

      8.23

       

      4

      6.24

      3.5

      3.88

      3.69

       

      5

      3.12

      1.71

      1.68

      1.70

       

      回歸方程:Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998

       人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

      圖 2 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

      3.3 樣品測定

      參考 2.2 中測試。結果見表 3。

       

       

      表 3

      五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定結果

       

       

       

       

       

      供試品批號

      稱樣量/mg

      積分面積

      測定結果

       

       

       

       

      粉劑 20121102

      34.2

      未檢出

      <0.004%

      粉劑 20123012

      36.7

      未檢出

      <0.004%

      粉劑 20121130

      31.9

      未檢出

      <0.004%

      液體 20130303**

      904.8

      1.88

      0.00093%

      液體 20130408**

      524.0

      1.55

      0.0013%

      備注:粉劑樣品,稱量后加入 2.0ml H2O 分析;

      液體樣品,稱量后加入 H2O 定容至 5ml 后,取 2.0ml 分析。

       人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

      圖 3 五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定色譜圖


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